قلی خانی فعالیت بازیگری را در سال ۱۳۷۶ با بازی در تئاتر «آنتیگونه» در تئاتر شهر تهران آغاز کرد. شهریار بحرانی که از بازی قلی‌خانی خوشش آمده بود، او را برای ایفای نقش حضرت مریم در فیلم سینمایی «مریم مقدس» انتخاب کرد.

گلاره اسدی بازیگر تلویزیون و سینما هم در صفحه اینستاگرامش مادر شدن این بازیگر را به او تبریک گفت. او نوشته: «قول داده بودم این هفته پر باشد از خبرهای خوب. شبنم خانم مبارک همه‌ی ما باشه مادر شدنت، رفیق نازنینم.»

قلی‌خانی تا به حال در سریال‌های مختلفی به ایفای نقش پرداخته که از بین‌آن‌ها می‌توان به «اولین شب آرامش»، «سرزمین کهن»، «نردبام آسمان» اشاره کرد.